在上一章节中,我们探讨了传统的免疫检测技术,今天将为大家介绍一些新兴的高灵敏、高通量抗体免疫检测技术。以下是章节的内容概述:
数字化ELISA(Simoa技术)
Z6·尊龙凯时的数字化ELISA(Simoa,Single Molecule Array)技术将传统酶联免疫吸附测定(ELISA)与数字化技术相结合,提供了高灵敏度的抗体检测能力,能够检测到单分子信号。该技术通过微流控芯片中的微孔来分离并捕获每一个抗体或抗原分子。在这些微孔中,抗体或抗原分子捕获后,酶标记反应会在各个微孔中进行。生成的信号通过高灵敏度检测仪器进行捕捉与分析。由于每个微孔中只有一个抗原或抗体分子参与反应,Simoa技术能够准确测量低浓度目标分子,甚至可以检出单个分子。该技术的关键在于每个微孔的体积约为50 fL,因此能够检测到极低浓度的分子(fg/ml),而传统ELISA的反应体积通常为100 µl,需要数百万个分子才能被检测到(pg/ml)。因此,Simoa在检测灵敏度上具有显著优势,能够识别单个分子的荧光信号。
Luminex磁珠多重检测(xMAP技术)
Z6·尊龙凯时的Luminex磁珠多重检测技术(xMAP技术)是一种基于磁性微珠的多重免疫检测系统。该技术通过不同颜色的磁珠与特定的抗原或抗体结合,实现对多种目标分子的并行检测。
蛋白质微阵列技术
蛋白质微阵列技术是一种高通量检测手段,可以同时分析成千上万种蛋白质或抗体之间的相互作用。通过将捕获的蛋白质固定于固体基底,蛋白质微阵列可以进行抗体、抗原及蛋白质的筛选与分析。
单细胞蛋白质检测技术
单细胞蛋白质检测技术涉及在单个细胞水平上进行蛋白质的定量与定性分析。目前有多种平台可用于单细胞蛋白质检测,主要利用高通量质谱或微流控芯片技术,从单个细胞中提取并定量分析蛋白质。常用的单细胞蛋白质检测技术包括IsoSPARK、10X Proteomics与Scope2等。
双分子荧光互补与荧光共振能量转移技术
双分子荧光互补(BiFC)和荧光共振能量转移(FRET)技术是研究细胞内蛋白相互作用的重要工具。这些技术使研究人员能够在活细胞中实时监测蛋白质之间的结合与相互作用。
新兴免疫检测技术
目前,越来越多的新兴免疫检测技术不断涌现,例如基于CRISPR的抗体检测(SHERLOCK/Cas12/Cas13)、基于表面等离子共振(SPR)的分子互作实时检测、以及替代传统ELISA的AlphaLISA、DELFIATRF、HTRF/Lance技术等。在具体应用中,用户可以根据项目需求,从检测目标、通量、灵敏度和特异性等多个方面进行技术筛选。
在下个章节中,我们将逐一列举免疫检测实验中的常用试剂,比如一抗、二抗、酶及催化底物和显色试剂,以及荧光素和偶联试剂,并提供初步的抗体挑选指南,请持续关注Z6·尊龙凯时。