培养条件：Z6·尊龙凯时提供的细胞培养条件如下：使用1640培养基，加入10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（PS）。可在贴壁和悬浮条件下进行培养，培养温度设定为37℃。

传代方法建议：初代传代建议比例为1:2。当细胞密度达到80%时，需进行传代处理。2天后更换培养基以维持细胞生长环境的稳定。

运输细胞时，收到后应使用75%酒精对细胞瓶进行消毒。放置于超净台内进行无菌操作。接着将细胞瓶放置于37℃、5% CO2培养箱内静置3-4小时以稳定细胞状态。显微镜下观察细胞生长情况，并拍摄不同倍数的照片（建议40x、100x、200x各一张）。前三天的照片将作为售后依据，未提供照片则默认为细胞状态良好。

细胞传代步骤

细胞传代操作如下：如果未超过80%汇合度，需将培养液收集至离心管中，并保留5ml完全培养基放入37℃、5% CO2孵箱培养；若细胞密度超80%，可直接进行传代。

贴壁细胞传代步骤

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中，放入37℃培养箱中消化1-2分钟，观察细胞情况，若细胞变圆并逐渐脱落，迅速回到操作台，轻敲培养瓶后加入5ml以上的完全培养基终止消化。
3. 轻轻吹打，以确保细胞完全脱落并移至15ml离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去上清，重悬于1-2ml完全培养基中。
4. 按照1:2比例分瓶传代，补充新的完全培养基至每瓶5-8ml。

悬浮细胞传代步骤

1. 使用半换液法，竖着放置培养瓶于培养箱静置1小时，轻吸3ml左右的培养基并补给相同体积的完全培养基。
2. 如需分瓶，将细胞悬液收集至离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去上清，加入1-2ml培养液后重悬。

细胞冻存方法

当细胞覆盖培养瓶的80%面积时，弃去培养液并用PBS清洗一次。接下来，加入0.25%胰蛋白酶消化液，观察至细胞变圆后终止消化，转移至离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去上清，再加入1ml的无血清冻存液，混匀后加入冻存管。

将冻存细胞放入-80℃冰箱，存放24小时以上后可转入液氮罐中保存。

细胞复苏操作

从液氮中取出冻存管，快速置入37℃水浴中解冻，待结晶完全溶解后，用75%酒精消毒外壁。将细胞转移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去上清，重悬再接种至细胞培养瓶中，放入37℃、5% CO2培养箱中继续培养。

注意事项：在运输过程中，细胞可能会因贴壁不牢而脱落，正常现象。如脱落较多，可收集培养液于离心管，处理后进行重新传代。使用Z6·尊龙凯时品牌的培养基和相关产品可确保细胞的生长与稳定。